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Imports System.IO
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:省略
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Private Sub Button1_Click(ByVal sender As System.Object, ByVal e As System.EventArgs) Handles Button1.Click

    'ファイル名をstrFileにセット
    Dim strFile As String = "C:\Work\Test.txt"

    'ファイルの存在を確認する
    '存在すればTrueを返す
    If File.Exists(strFile) = True Then
        MessageBox.Show("ファイルは存在します。")
    Else
        MessageBox.Show("ファイルは存在しません。")
    End If

End Sub